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凝胶成像系统常见的测量应用

发布时间:2020-12-18      点击次数:294
   凝胶成像系统:对蛋白质或核酸凝胶进行观察、成像的实验仪器,并可进行分子量计算、含量计算、密度分析等半定量分析。
  总体上来说凝胶成像可应用于:凝胶成像系统可以用于:蛋白质、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分离纯化结果作定性分析。
  凝胶成像系统的常见的测量应用:
  (1)分子量定量
  对于一般常用的DNA胶片,利用分子量定量功能,通过对胶上DNAMarker条带的已知分子量注释,自动生成拟合曲线,并以它衡量得到未知条带的分子量。通过这种方法所得到的结果较肉眼观察估计要准确很多。
  (2)密度定量
  一般常用的测定DNA(脱氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)浓度的方法是紫外吸收法,但它只能测定样品中的总核苷酸浓度,而不能区分各个长度片段的浓度。利用凝胶成像系统和软件,先将DNA胶片上某一已知其DNA含量的标准条带进行密度标定以后,可以方便的单击其他未知条带,根据与已知条带的密度做比较,可以得到未知DNA的含量。此方法也适用于对PAGE蛋白胶条带的浓度测定。
  (3)密度扫描
  在分子生物学和生物工程研究中,常用到的是对蛋白表达产物占整个菌体蛋白的百分含量的计算。传统的方法是利用的密度扫描,但利用生物分析软件结合现在实验室常规配备的扫描仪或者直接用白光照射的凝胶成像就能完成此项工作。
  (4)PCR定量
  PCR定量主要是指,如果PCR实验扩增出来的条带不是一条,那么可以利用软件计算出各个条带占总体条带的相对百分数。就此功能而言,与密度扫描类似,但实际在原理上并不相同。PCR定量是对选定的几条带进行相对密度定量并计算其占总和的百分数,密度扫描时并对选择区域生成纵向扫描曲线图并积分。
  上海培清化学发光凝胶成像可对对ECL发光等直接曝光成像,并获得实验结果。以往实验室主要使用暗室曝光压片进行ECL检测,但建造暗室成本高而且浪费实验室空间,曝光步骤繁琐,冲洗X胶片时还会接触到有毒的化学试剂。化学发光成像系统的使用已经逐渐取代传统的暗室压片曝光检测。
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