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简述垂直转印电泳槽的正确使用方法

更新时间:2023-06-15      点击次数:1110
  垂直转印电泳槽是一种常见的电泳设备,用于将蛋白质、DNA、RNA等生物大分子的分离和鉴定。其工作原理是利用电场的作用,使带电的生物大分子在凝胶介质中向相反电荷的方向移动,从而达到分离的目的。
 

 

  下面将介绍垂直转印电泳槽的使用方法:
 
  1、制胶:选择所需间隔厚度的垫条玻璃板,玻璃板上标记的箭头方向向上,玻璃板上有垫条的那面面对操作者。薄玻璃板平行盖在垫条上。将上述一套玻璃板垂直放入制胶支架,在平整的桌面上将垫条玻璃和薄玻璃的底面在制胶支架上的锁紧门向二侧旋转锁紧,完成一个制胶单元。将准备好的制胶单元的底面压到制胶固定架的密封相交条上,制胶支架的后边尽量靠近制胶固定架,左手轻轻下压垫条玻璃板上缘至制胶固定架的弹簧夹能卡住为止,右手调整弹簧夹,使弹簧夹能固定在垫条玻璃的中间位置。按要求调配合适浓度的胶灌入二块玻璃板中间的间隙中至薄玻璃板上缘1mm处,插入对应厚度和齿数的梳子,等待胶的凝固。
 
  2、电泳槽准备:将已制完的二组玻璃板分别装入电极架的两面,玻璃板的底部架在电极架的支脚上,薄玻璃的边缘与电极架的红色橡胶条紧贴。如仅走一块胶,可用提供的玻璃替代塑料片装在电极架的另一面。将装完玻璃板的电极架插入垂直槽槽内固定架,并确认电极架已到底。再下压已装入的电极架的电极二边外突部分,使玻璃底面与电极架支脚面分离。将垂直槽槽内固定架上的锁紧门向中间旋转锁紧。
 
  3、电泳:在内槽中加入电泳缓冲液,直至电泳液溢出到外槽中,外槽中电泳液高度约3—5cm。在梳井内加样,注意避免引入气泡。盖好上盖。保证电极架的正负极与槽盖的正负极始终相对应。接通电泳仪,电压推荐使用60V—200V。
 
  总之,垂直转印电泳槽是一种重要的生物分子分离和鉴定设备,使用时需要注意安全和准确性等方面。只有正确地使用和维护设备,才能保证分离效果和延长设备的使用寿命。
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